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BIENVENIDA!! A ESTE MUNDO DONDE LOS
MICOORGANISMOS SE CREEN VICTORIOSOS...... !!!SU VICTORIA DEPENDE DE TI !!!!!
Verdad Que Da Terror
¡!!!! Estar Rodeado Constantemente y No Ver a Tantos Enemigos Que Pueden Provocarnos La Muerte.........
La Mejor Arma Es Verlos, Conocerlos Saber Donde Se Encuentran Para Poder Contraatacarlos. Si Se Pudieran Ver Seria Algo Así……
Para Iniciarlos En Este Mundo De Microorganismos Les Brindare
Información Sobre Una De Las Mejores Armas Que Tenemos Para Ubicarlos y Conocerlos.
La Tinción De Gram
Voy a iniciar, hablandoles un poco de la importancia y origen de la tinción de Gram......
La tinción de Gram es
uno de los métodos de tinción más importantes en el laboratorio bacteriológico
y con el que el estudiante debe estar perfectamente familiarizado. Su utilidad
práctica es indiscutible y en el trabajo microscópico de rutina del Laboratorio
de Microbiología las referencias a la morfología celular bacteriana, se basan justamente en la tinción de GRAM.
Esta tinción se denominada así por el
bacteriólogo danés Christian Gram, quien la desarrolló en 1844. Sobre la base
de su reacción a la tinción de Gram, las bacterias pueden dividirse en dos
grupos, Gram positivas y Gram negativas (en este caso, los términos positivo y
negativo no tiene nada que ver con carga eléctrica, sino simplemente designan
dos grupos morfológicos distintos de bacterias).
Las bacterias Gram-positivas y
Gram-negativas se tiñen de forma
distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes. La pared de la célula bacteriana sirve para
dar su tamaño y forma al organismo así como para prevenir la lisis osmótica. El
material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el
peptidoglicano.
La pared de la célula Gram-positiva es
gruesa y consiste en varias capasinterconectadas de peptidoglicano así como
algo de ácido teicoico. Generalmente, 80%-90% de la pared de la célula Gram
-positiva es peptidoglicano. La pared de la célula Gram-negativa, por otro
lado, contiene una capa mucho más delgada, únicamente de peptidoglicano y está
rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolípidos, lipopolisacáridos,
y lipoproteínas. Sólo 10% - 20% de la pared de la célula Gram-negativa es
peptidoglicano.
A continuación se describirá en detalle la tinción de Gram:
FIJAR MUESTRA Y TEÑIR CON VIOLETA
Las células del frotis, fijadas al calor
sobre un portaobjeto se tiñen, primero con una solución de cristal violeta
durante un minuto (otros colorantes básicos no son tan efectivos) y son lavadas
después para quitar el exceso de colorante con agua destilada. En este estado,
todas las células, tanto las Gram positivas como las Gram negativas, están
teñidas de azul.
COLOCAR EL LUGOL
El portaobjetos se cubre entonces con una
solución de yodo-yoduro potásico durante un minuto y luego de lava. El
ingrediente activo es el I2; el KI simplemente hace soluble el I2 en agua. El I2
entra en las células y forma un complejo insoluble en agua con el cristal
violeta. De nuevo tanto las células Gram positivas como las Gram negativas se
encuentran en la misma situación.
DECOLORAR CON ALCOHOL ACETONA
Se lleva a cabo después la decoloración,
usando una mezcla de alcohol-acetona, sustancias en las que es soluble el
complejo I2-cristal violeta. Algunos
organismos (Grampositivos) no se decoloran, mientras que otros (Gramnegativos)
lo hacen. La diferencia esencial entre esos dos tipos de células está por tanto
en su resistencia a la decoloración.
Esta resistencia se debe probablemente al
hecho de que en el caso de bacterias Gram-negativas, la mezcla de alcohol/acetona
es un solvente lipídico y disuelve la membrana exterior de la pared de la
célula permitiendo la salida de la tinción violeta por esos poros (y también puede dañar la membrana citoplásmica a la que se une
peptidoglicano). La delgada capa de peptidoglicano es incapaz de retener el de
complejo cristal violeta-yodo y la célula se decolora.
Las células Gram positivas, a causa de sus
paredes celulares más espesas (tienen más peptidoglicano y menos lípido), no
son permeables al disolvente ya que éste deshidrata la pared celular y cierra
los poros, disminuyendo así el espacio entre las moléculas y provocando que el
de complejo cristal violeta-yodo quede atrapado dentro de la pared celular.
Después de la decoloración las células Gram positivas son todavía azules, pero
las Gram negativas son incoloras.
Añadiendo la Safranina
Para poner de
manifiesto las células Gram negativas se utiliza una coloración de contraste.
Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina
básica. Después de la coloración de contraste las células Gram negativas son
rojas, mientras que las Gram positivas permanecen azules.
! VES LO FACIL Y RAPIDO DE REALIZAR
UN GRAM!
"Al finalizar esta lectura Toma nota de los aspectos que más llamaron tu atención, ya que debes realizar un ensayo donde se lea tu apreciación sobre el tema".
Debido a que la Fundamentación de la coloracion de Gram se debe a la estructura de la pared bacteriana es vital que tengan en claro esa diferencia . Es por ello que para reforzar ese conocimiento les coloco esta presentación donde se explica en detalle los componentes y diferencia de la pared de bacterias Gram positiva y Gram negativa
......Ahora debes realizar como actividad un dibujo esquemático que permita destacar las diferencias entre las bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, señalando los componentes en cada caso y publicarlo en el blog.
Es importante resaltar
algunos aspectos cruciales de la tinción
de Gram:
1) El tratamiento con
cristal violeta debe preceder al tratamiento con yodo. El yodo por sí solo
tiene poca afinidad con las células.
2) La decoloración
debe realizarse con poca agua para evitar que pierdan la tinción las células Gram
positivas. EI proceso de decoloración debe ser corto y es esencial un cálculo
preciso del tiempo para obtener resultados satisfactorios.
3) Cultivos más viejo
de 24 horas pueden perder su habilidad de retener el complejo cristal violeta -
yodo.
El carácter de Gram positivo
no es siempre un fenómeno del todo o nada. Algunos organismos son más Gram positivos
que otros y algunos son Gram-variables, es decir, unas veces Gram positivos y
otras Gram negativos
Para finalizar y te encuentres listo para la aplicación del conocimiento adquirido a través de esta información, debes ver la reproducción de este video que te ilustrara paso a paso lo que tienes que realizar en tu practica de laboratorio de microbiología.
Realiza un ensayo, de su apreciación e importancia del material
leído y observado en video, de una pagina y publicalo en los comentarios del Blog.
Podrás disponer de 4 horas semanales por dos
semanas antes de realizar la practica en el laboratorio para leer observar y
discutir el material .
Realiza
la Practica de Tinción de Gram en el laboratorio de
Microbiología de la UJAP
Tomaras una foto de lo observado
en el microscopio e identificará cada elemento. Debes publicarlo
como parte de la evaluación en el blog.
Además Interpretaras el resultado de la muestra y lo Publicaras en el blog.
FELICIDADES AHORA DISPONES DE UNA HERRAMIENTA QUE PODRAS UTILIZAR CUANDO REQUIERAS VER LOS MICROORGANISMOS QUE NOS ACECHANNNN…………
UNO DE ESOS MICROORGAMOS QUE NOS ACECHAN ES UN VIRUS QUE MUCHOS CATALOGAN COMO EL ASESINO NUMERO UNO EL EBOLA ¿Qué es Ébola?
El virus del Ébola es un virus de la familia Filoviridae y género
Filovirus, situación taxonómica que comparte con el virus de Marburgo.
Este nombre proviene del río Ébola (en la República Democrática del
Congo, antiguo Zaire), donde fue identificado por primera vez en 1976
durante una epidemia con alta mortalidad.
El virus del Ébola causa fiebre hemorrágica viral, la cual se refiere
a un grupo de virus que afectan a múltiples sistemas de órganos en el
cuerpo y con frecuencia se acompañan de sangrado. Los primeros síntomas
incluyen la aparición repentina de fiebre, debilidad, dolor muscular,
dolores de cabeza y dolor de garganta. Más tarde progresan a vómitos,
diarrea, alteración de la función renal y hepática – y sangrado a veces
interno y externo. El virus se propaga a través del contacto con los
órganos y fluidos corporales tales como sangre, saliva, orina y otras
secreciones de las personas infectadas. Es el causante de la fiebre
hemorrágica del Ébola o enfermedad del Ébola,1 una enfermedad infecciosa
muy grave, que afecta tanto a seres humanos como otras especies de
mamíferos.
Virología Las dos especies tipo del género Filovirus, el único conocido en la
familia Filoviridae. Esta familia comparte muchas características con
las familias Paramyxoviridae y Rhabdoviridae; todas conforman el orden
Mononegavirales. El virus del Ébola no presenta reacciones serológicas cruzadas con el
virus de Marburgo. Esto permite su identificación serológica. Morfología Tanto el virus del Ébola como el virus de Marburgo son virus
pleomórficos (de morfología variable), cuyos viriones suelen presentar
formas filamentosas (de ahí su catalogación como “filovirus”; ver
imagen) que pueden alcanzar grandes longitudes (hasta 14 000 nm); sin
embargo, presentan un diámetro bastante uniforme (aproximadamente 80
nm). El genoma del virus consiste en una molécula única de ARN
monocatenario lineal de polaridad negativa (19,1 kb) que tiene la
información codificada para siete proteínas estructurales que forman el
virión. El virión está constituido por un nucleoide proteico con forma
tubular (20-30 nm de diámetro) rodeado por una cápsida helicoidal (40-50
nm), recubierta a su vez por una membrana regularmente espiculada, su
envoltura viral, estructuralmente integrada por una única glicoproteína
viral. El nucleoide está constituido por dos tipos de proteínas: la proteína
NP, cuya función es estructural, y la proteína L, una ARN polimerasa.
La cápsida se conforma por varias proteínas: proteína P, VP30 (proteína
que le permite desdoblarse dentro de una célula hospedadora), VP35, VP24
y VP40. Las proteínas VP24 junto con la VP40 forman una matriz que
mantiene unidos el nucleoide con la cápsida (nucleocápsida viral). Epidemiología
Brotes de fiebre del Ébola en África desde 1979 a 2008. El virus se transmite por contacto directo con líquidos corporales y
excreciones infectados como la sangre, la saliva, el sudor, el semen, el
flujo vaginal, sumado a los líquidos biológicos de estudios bioquímicos
como el cefalorraquídeo, el sinovial, el pleural o el peritoneal,
además de la orina, las heces, o los vómitos, tanto de animales
—principalmente simios y murciélagos— como en humanos, ya sea vivos o
fallecidos. También por contacto indirecto a través de fómites o
reservorios animales: aquéllos que presentan la infección en forma
asintomática (sin síntomas) pero contagiosa. Las ceremonias de
inhumación que se celebran en ciertas aldeas africanas debido a la
idiosincrasia parecen estar relacionadas en el contagio, ya que los
miembros del cortejo fúnebre entran en contacto directo con el cadáver.2
La causa del caso índice aún es desconocida. El período de incubación varía de 2 a 21 días, aunque lo más normal es de 5 a 12 días. Se considera que los murciélagos frugívoros, en particular
Hypsignathus monstrosus, Epomops franqueti y Myonycteris torquata, son
posiblemente los huéspedes naturales del virus del Ébola en África. Por
ello, la distribución geográfica de los Ebolavirus puede coincidir
inicialmente con la de dichos murciélagos.4 En el año 1976 murieron alrededor del 92 % de los infectados. Dada la naturaleza letal del Ébola, ya que no existe una vacuna
aprobada5 o el tratamiento no está disponible, está clasificado como un
agente de bioseguridad de nivel 4, así como de Categoría A un agente de
bioterrorismo por los Centros para el Control y Prevención de
Enfermedades. Tiene el potencial de servir como arma para su uso en la
guerra biológica. La eficacia como arma biológica se ve comprometida por
su letalidad rápida ya que los pacientes mueren rápidamente antes de
que estén en condiciones de propagación del contagio. En el 2014 en los Estados Unidos fue probado un suero de manera
experimental en dos personas contagiadas por este virus; tal suero
podría ser la cura para esta enfermedad aunque no se tienen más detalles
del mismo. En España en 2014 también se aplicó este suero a un
paciente, que sin embargo 2 días después falleció.6
Número básico de reproducción – R0 El número básico de reproducción – R0 del ébola es bajo comparado con
otras enfermedades contagiosas como SARS, SIDA, o la gripe española de
1918, esto significa que cada caso individual produce menos contagios
que estas enfermedades durante el período de infección del paciente. En
el caso del ébola el R0 se encuentra entre 1.2 y 1.9 lo que significa
que cada persona infectada, en promedio contagiara a entre 1.2 y 1.9
personas durante la duración de la misma. Zoonosis La zoonosis, más específicamente la antropozoonosis: contagio de
animales a humanos, es de suma importancia estudirala en la
epidemiología de las enfermedades infecciosas humanas. En cuanto a esta
patología específica, en un estudio científico en Gabón, en donde se
habían registrado casos humanos del Ébola, se ha investigado una muestra
de perros silvestres que llegarían a comer animales salvajes
posiblemente infectados, los cuales presentaron estudios serológicos del
32% positivos a anticuerpos específicos contra el virus en cuestión. Dichos estudios llegaron a la conclusión, en el año 2005, de que los
animales domésticos pueden por lo tanto infectarse y excretar el virus
durante un período determinado para cada especie animal, convirtiéndose
así en una fuente de infección para los humanos. Es muy necesario
evaluar el papel de los perros domésticos en las epidemias de la
enfermedad y poder así controlarla, según el Instituto de Investigación
para el Desarrollo de París. En la actualidad, octubre de 2014, surgió un caso de Ébola en Madrid
por contagio de una enfermera auxiliar que se dedicaba a la atención de
un segundo enfermo de Ébola traído desde África que terminó falleciendo,
convirtiéndose así en el primer caso de esta enfermedad pandémica
contagiada fuera de África. Su marido, quien mantuvo mayor contacto con
dicha enfermera auxiliar, presenta serología negativa por el momento,
pero las autoridades, ante el riesgo, determinaron sacrificar
unilateralmente al perro de la familia llamado Excálibur sin haberle
realizado estudio serológico alguno. Esto hizo imposible comprobar si el
animal había podido ser fuente de contagio o, eventualmente, estudiar
la actividad del virus en animales domésticos. El dueño no autorizó el
sacrificio.8 Este tema en particular es de potencial importancia para estudios y
seguimientos de la enfermedad en animales domésticos, en este caso con
un perro, para determinar si efectivamente estos animales representan un
foco de infección en las epidemias del Ébola, ya que las aldeas
africanas afectadas están con sobrepoblación de los mismos, tanto
domésticos como asilvestrados. Afección en poblaciones de simios Los autores del estudio han comprobado que el desfase del inicio de
la mortandad entre los distintos grupos de gorilas vecinos es muy
cercano a la longitud del ciclo de la enfermedad de ZEBOV (doce días),
lo que evidencia que la transmisión de grupo a grupo ha amplificado la
mortandad mencionada. La investigación concluye que la muerte de más de
5000 gorilas en el área de estudio es un caso único de pérdida de
efectivos en una población animal en tan poco tiempo y, a la vez,
manifiesta que la transmisión entre familias amplifica los episodios de
mortandad. Hasta ahora se especulaba sobre la hipótesis de que la
transmisión se producía a través de diversos focos de contagio entre la
especie portadora del virus y los gorilas (Nature publicó un artículo a
principios de 2014 en el que se señalaba la posibilidad de que fueran
algunas especies de murciélago).
Aparición de cepas y brotes del Ébola
La cepa Ébola-Zaire tiene la mayor tasa de mortalidad, hasta 90 % en algunas epidemias, con una media de un 83 %.
El primer brote tuvo lugar el 26 de agosto de 1976 en Yambuku, una
ciudad del norte de Zaire (actualmente, República Democrática del
Congo). El primer caso registrado fue Mabalo Lokela, un profesor de
escuela de 44 años que volvía de un viaje por el norte del Zaire. Su
alta fiebre fue diagnosticada como un caso de malaria, y en consecuencia
se le administró quinina. Lokela volvió al hospital cada día; una
semana después, sus síntomas incluían vómitos incontrolables, diarrea
sangrienta, dolor de cabeza, mareos y dificultades respiratorias. Más
tarde empezó a sangrar por nariz, boca y ano muriendo el 8 de septiembre
de 1976, apenas 14 días después de manifestársele los primeros
síntomas. Brote de Ébola en África Occidental de 2014
En 2014 surgió el mayor brote de la historia de esta cepa[cita
requerida] y también el mayor brote de ébola hasta entonces, afectando
inicialmente a Guinea-Conakry y expandiéndose posteriormente a Sierra
Leona, Liberia y Nigeria. El 8 de agosto de 2014, la OMS decretó la situación como “emergencia
pública sanitaria internacional” y recomendó medidas para detener su
transmisión en medio de la expectante preocupación mundial ante el
riesgo de pandemia global. Entre ellas, pedía a los países donde se
habían detectado afectados que declarasen emergencia nacional y hacía
una llamada a la solidaridad internacional. La declaración se producía al rondar la cifra de 1000 fallecidos por
la epidemia que amenazaba con seguirse extendiendo tras fallar los
mecanismos de contención iniciales. Los primeros afectados transportados
oficialmente a Estados Unidos durante el brote, fueron llevados a
Atlanta para ser tratados con ZMapp[cita requerida], un suero
experimental procedente de Ginebra que había dado resultados positivos
con simios. El día 9 de ese mes se confirmaba que España había recibido
dicho fármaco Primer contagio de Ébola fuera de África
El 7 de octubre de 2014 se declara en el Hospital Carlos III de
Madrid (España) el primer caso de contagio de Ébola fuera de África10
(véase también: Ébola en España).Una de la auxiliares de enfermería que
atendieron al misionero repatriado desde Sierra Leona Manuel García
Viejo (fallecido a causa del virus) resultó contagiada por la
enfermedad. El sindicato de funcionarios CSI-F, que afirma haber
advertido con anterioridad que “el Hospital no disponía de
infraestructuras para abordar un virus de este calado”, achaca el
contagio de la auxiliar de enfermería a “al desmantelamiento del
hospital Carlos III de Madrid, a los recortes en el presupuesto
sanitario, a la falta de medios y formación a los trabajadores
sanitarios para tratar esta enfermedad y a que el protocolo no ha
funcionado adecuadamente”. Cepa Ébola-Sudán
El Ébola-Sudán fue la segunda cepa clasificada del virus, en 1976.
Aparentemente se originó entre los trabajadores de una fábrica de
algodón en Nzara, Sudan, ya que el primer caso registrado fue uno de los
trabajadores. Sin embargo, los científicos que analizaron a todos los
animales e insectos que había en la fábrica, no pudieron encontrar
ninguno que diese positivo al virus Ébola. El transmisor original aún se
desconoce. Cepa Ébola-Reston
Apareció en noviembre de 1989 en un grupo de cien macacos (Macaca
fascicularis) importados desde Filipinas hasta Reston (Virginia), EE.
UU.. Otro cargamento de macacos infectados fue también enviado a
Filadelfia, EE. UU. Esta epidemia fue altamente letal en los macacos,
pero no causó ninguna muerte entre los humanos. Sin embargo, 6 de los
encargados de manipular los animales dieron positivo al virus, dos de
ellos debido a una exposición previa. Sobre este incidente el escritor
estadounidense Richard Preston escribió un libro de notable éxito:22 The
Hot Zone,23 traducido al español con el título de Zona caliente. Más
monos infectados con Ébola-Reston fueron enviados de nuevo a Reston y
Texas en febrero de 1990. También se detectaron en 1992 en Siena
(Italia) y en Texas de nuevo en marzo de 1996. Ningún humano fue
infectado en estos últimos brotes. El 23 de enero de 2009, el Gobierno de Filipinas anunció la detección
de anticuerpos IgG frente al virus Ebola Reston (ERV) en una persona
que podía haber estado en contacto con cerdos enfermos. El 30 de enero de 2009, el Gobierno filipino anunció la detección de
anticuerpos anti-ERV en otras cuatro personas: dos granjeros de Bulacán y
otro de Pangasinán (las dos granjas, ambas en el norte de Luzón, están
en cuarentena por haberse detectado infecciones porcinas por ERV) y un
carnicero de un matadero de Pangasinán. El caso seropositivo anunciado
el 23 de enero tiene una explotación doméstica de cerdos en Ciudad
Valenzuela (un barrio del área metropolitana de Manila). Unos 6000 cerdos de una explotación ganadera situada al norte de
Manila fueron sacrificados para impedir la expansión de una epidemia del
virus Ébola-Reston. Estos recientes casos en Filipinas representan la primera vez que el
Ébola-Reston ha sido detectado en cerdos, y también la primera vez que
se sospecha una transmisión del virus Ébola-Reston desde el cerdo al ser
humano. La epidemia acabó causando 151 muertes entre las 285 personas que resultaron infectadas. Cepa Ébola-Tai-Forest
Este subtipo de Ébola fue descubierto entre los chimpancés de los
bosques de Thai en Costa de Marfil. El 1 de noviembre de 1994, se
encontraron los cadáveres de dos chimpancés en este bosque. Las
autopsias revelaron que había sangre marrón en el corazón de los dos
chimpancés, y que uno de ellos presentaba los pulmones encharcados de
sangre. Los estudios de los tejidos tomados de los chimpancés arrojaron
muchas similitudes con la cepa Ébola-Zaire que durante 1976 causó
estragos en Zaire y Sudán. Más tarde, en 1994, se encontraron más
chimpancés muertos, muchos de ellos dieron positivo al Ébola tras
utilizarse tests moleculares. Se cree que el origen del brote fue la
carne de algunos monos infectados de la especie Colobus roja que los
chimpancés atacaban. Una de los científicos que llevaron a cabo las
autopsias de los chimpancés infectados contrajo Ébola. Desarrolló los
primeros síntomas, similares al dengue o la malaria, aproximadamente una
semana después de las autopsias. Fue transportada a Suiza para recibir
tratamiento. Dos semanas después fue dada de alta, y seis semanas
después de la infección estaba completamente recuperada. Cepa Ébola Bundibugyo
El 29 de noviembre de 2007, el ministro ugandés de Salud confirmó que
la fiebre hemorrágica que ha matado al menos a 35 personas y que ha
infectado a 127 en Uganda, ha sido provocada por el virus del Ébola. Las
muertes se registraron en la región de Bundibugyo, en la frontera con
la República Democrática del Congo. Tras analizar las muestras el
Laboratorio Nacional de Estados Unidos y el Centro para el Control de
las Enfermedades, la Organización Mundial de la Salud ha confirmado que
se trata de una nueva cepa del virus Ébola.